Fenilgalactósido CAS: 2818-58-8

Efecto sobre a actividade encimática: o fenilgalactosido úsase habitualmente para medir a actividade do encima β-galactosidase. Cando o fenilgalactosido é hidrolizado pola β-galactosidase, libera p-nitrofenol. A acumulación de p-nitrofenol pódese medir cuantitativamente, o que proporciona información sobre a actividade da β-galactosidase. Este efecto aprovéitase en aplicacións como os ensaios encimáticos e os sistemas de cribado.

Análise da expresión xénica: o fenilgalactósido úsase a miúdo como substrato en experimentos de bioloxía molecular para estudar a expresión xénica. O xene lacZ, que codifica a β-galactosidase, adoita fusionarse con secuencias reguladoras doutros xenes de interese. A expresión do xene lacZ e a hidrólise do fenilgalactósido pola β-galactosidase poden indicar o patrón e o nivel de expresión do xene diana que se está a estudar.

Sistemas de cribado: o fenilgalactosido é un compoñente importante dos sistemas de cribado que empregan a actividade da β-galactosidase. Un exemplo amplamente coñecido é o método de cribado azul-branco, que se emprega para identificar células recombinantes ou transformadas en experimentos de bioloxía molecular. As colonias que absorberon con éxito o ADN recombinante ou sufriron recombinación xenética expresarán β-galactosidase, o que levará á hidrólise do fenilgalactosido e á formación dunha cor azul.

Purificación de proteínas: Nalgúns casos, o fenilgalactosido pódese empregar como ligando para a cromatografía de afinidade para purificar proteínas que se unen especificamente á β-galactosidase ou son activadas por ela. A proteína de interese pode ter unha etiqueta de afinidade ou unha etiqueta de fusión que conteña un dominio de unión á β-galactosidase. Ao pasar a mestura de proteínas a través dunha columna con fenilgalactosido inmobilizado, a proteína desexada pódese retir selectivamente e posteriormente eluír.