Fenilgalactosido CAS: 2818-58-8

Efecto sobre a actividade do encima: o fenilgalactosido úsase habitualmente para medir a actividade do encima β-galactosidase.Cando o fenilgalactosido é hidrolizado pola β-galactosidasa, libera p-nitrofenol.A acumulación de p-nitrofenol pódese medir cuantitativamente, proporcionando información sobre a actividade da β-galactosidase.Este efecto aproveitase en aplicacións como ensaios enzimáticos e sistemas de cribado.

Análise da expresión xénica: o fenilgalactosido úsase a miúdo como substrato en experimentos de bioloxía molecular para estudar a expresión xénica.O xene lacZ, que codifica a β-galactosidase, fusiona habitualmente con secuencias reguladoras doutros xenes de interese.A expresión do xene lacZ e a hidrólise do fenilgalactosido pola β-galactosidasa poden indicar o patrón de expresión e o nivel do xene diana que se estuda.

Sistemas de cribado: o fenilgalactosido é un compoñente importante dos sistemas de cribado que fan uso da actividade da β-galactosidasa.Un exemplo moi coñecido é o método de cribado azul-branco, que se usa para identificar células recombinantes ou transformadas en experimentos de bioloxía molecular.As colonias que tomaron con éxito o ADN recombinante ou sufriron unha recombinación xenética expresarán β-galactosidasa, o que levará á hidrólise do fenilgalactosido e á formación dunha cor azul.

Purificación de proteínas: nalgúns casos, o fenilgalactosido pódese usar como ligando para a cromatografía de afinidade para purificar proteínas que se unen especificamente á β-galactosidasa ou son activadas pola β-galactosidasa.A proteína de interese pode ter unha etiqueta de afinidade ou unha etiqueta de fusión que contén un dominio de unión á β-galactosidase.Ao pasar a mestura de proteínas a través dunha columna con fenilgalactosido inmobilizado, a proteína desexada pode ser retida selectivamente e posteriormente eluida.